苯甲脒瓊脂糖凝膠FF Benzamidine Berpharose FF
苯甲脒-瓊脂糖凝膠FF
（Benzamidine-Berpharose FF）
1.產品介紹
苯甲脒-瓊脂糖凝膠FF是一種將苯甲脒鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的生物親和層析分離介質。苯甲脒類物質是絲氨酸蛋白酶的廣譜抑制劑，該產品保留了瓊脂糖極好的親水性及大網架結構，與生物活性大分子有很好的相容性，主要用于純化胰蛋白酶、尿激酶和激肽釋放酶等絲氨酸蛋白酶，可以從血清、細胞上清液和菌體裂解液中一步純化樣品。
2.規格
1ml（預裝柱）、5ml（預裝柱）、10ml（預裝柱）、20ml、100ml、500ml、1L 純化流程
應用舉例：
平衡緩沖液：50 mM Tris-HCl，0.5M NaCl，pH7.4
結合緩沖液：50 mM Tris-HCl，0.5M NaCl，pH7.4
洗脫緩沖液：10 mM HCl，0.5M NaCl，pH2.0 或50mM甘氨酸，pH3.0
中和液: 1M Tris，pH8.5
競爭性洗脫液: 50mM Tris-HCl，20mM 4-氨基本甲脒0.5M NaCl，pH7.4
平衡：用3-5個柱體積的平衡緩沖溶液進行平衡，觀察檢測器的變化，直到電導率、
pH值等參數不變。
上樣：樣品的預處理，樣品需至少用0.45μm濾膜過濾，在上樣，以免堵塞層析柱。
上樣量根據樣品的性質和層析介質的量進行選擇，也可通過線性實驗找到最佳
上樣量。
淋洗：用5-10個柱體積的平衡緩沖液進行淋洗，觀察檢測器的變化，直到電導率、pH
值等參數基本不變。
（4）洗脫：使用 5-10 倍柱體積的洗脫液，收集洗脫峰（部分洗脫方式需中和液中和）。
（5）清洗保存：依次使用 3 倍柱體積的平衡緩沖液液和 5 倍柱體積的去離子水平衡填料，然后保存在等體積的保護液中，置于4-8 ℃保存。
5.在位清洗（CIP）：
填料可以重復使用無需再生，但隨著非特異性結合的蛋白的增多和蛋白的聚集，往往造成流速和結合載量都下降，這時可按照下面方法對樹脂進行清洗。
（1）去除一些沉淀或變性物質：用 2 倍柱體積的6M鹽酸胍或8M尿素溶液進行清洗，然后立即用5倍柱體積的去離子水清洗。
（2）去除一些疏水性吸附造成的非特異性吸附物質：用 3-4 倍柱體積的70%乙醇或2倍體積的1% Triton X-100 清洗，然后立即用5倍柱體積的去離子水清洗。
（3）去除一些離子鍵結合物質：用 3-4 倍柱體積的2M NaCl清洗，然后立即用5倍柱體積的去離子水清洗。
注意事項：
（1）使用時保證柱子和緩沖液的溫度一致，避免柱床內產生氣泡，影響純化效果。
（2）本產品保存條件為50mM NaAc，pH4.0，20%乙醇，4-8℃。
（3）運輸：4-25℃，常，,避光。
（4）僅供科研實驗使用。
苯甲脒瓊脂糖凝膠FF Benzamidine Berpharose FF